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HPLC灵敏度不够和柱压不稳的主要原因及解决办法
      

一、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法

1、样品量不足:解决办法为增加样品量 
2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或调解流动相的PH更换色谱柱
3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 
4、检测器衰减太多:调整衰减即可。 
5、检测器时间常数太大:可以降低时间参数 
6、检测器池窗污染:清洗池窗。 
7、检测池中有气泡:解决办法为排气。 
8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。 
9、流动相流量不合适:调整流速即可。 
10、检测器与记录仪超出校正曲线:解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。

二、HPLC分析时,柱压不稳定,原因何在?如何解决

1、泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; 
2、比例阀失效,更换比例阀即可。 
3、泵密封垫损坏,更换密封垫即可。 
4、溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; 
5、系统检漏,找出漏点,密封即可。

6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的

三、HPLC柱验收测试时柱压过高原因?

        柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,可按下面步骤检查问题的起因。

1、拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查; 
2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。 
3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动性)。这时,如果柱压仍不下降,再检查; 
4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。

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